大肠杆菌中一般应激蛋白Yhbo的克隆、表达和纯化
摘要：克隆、表达和纯化了大肠杆菌yhbO基因产物，该基因产物与枯草杆菌总应激蛋白18（yfkM基因产物）、嗜热菌细胞内蛋白酶PfpI和人类帕金森病蛋白DJ-1同源。通过聚合酶链式反应扩增从大肠杆菌中获得YhbO基因的编码，将其插入到表达质粒pET-21a中，在噬菌体T7启动子和lac操作子的转录控制下。通过转化YhbO表达载体pET-21a-yhbO的BL21（DE3）大肠杆菌菌株，在SDS-PAGE中积累了大量与预期的YhbO分子量20 kDa相匹配的可溶性蛋白。通过HPLC DEAE离子交换层析和羟基磷灰石层析将YhbO纯化至纯度，并通过N-末端测序和质谱分析确认其身份。该天然蛋白以单体、三聚体和六聚体形式存在。
作者：Jad Abdallah (IJM), Renee Kern (IJM), Abderrahim Malki (IJM), Viola Eckey (IJM), Gilbert Richarme (IJM)
论文ID：q-bio/0512028
分类：Genomics
分类简称：q-bio.GN
提交时间：2007-05-23