一个制备型质谱仪器用于沉积完整的大型天然蛋白质复合物
摘要：电喷雾离子束沉积（ES-IBD）是一种研究从小金属团簇到大蛋白质组装体的分子结构和反应性的多功能工具。它将分子温和地引入气相，使其能够准确操纵和纯化，然后在各种基底上进行控制沉积。结合成像技术，可以获得定义良好的分子的直接结构信息，这对于测试和解释间接质谱技术的结果至关重要。迄今为止，离子束沉积实验仅限于全球少数定制仪器，没有商业替代品。在这里，我们介绍一个模块，将离子束沉积能力添加到一种流行的商用质谱平台（Thermo Scientific$^{TM}$ Q Exactive$^{TM}$ UHMR）中。这种组合显著降低了与定制仪器相关的额外开销，同时又能从已建立的高性能和可靠性中受益。我们介绍了目前的性能特点，包括束流强度、落地能量控制和广泛范围的分子沉积斑点大小。结合原子力显微镜（AFM）和透射电子显微镜（TEM），我们区分了接近天然和展开的蛋白质，并展示了蛋白质组装体在脱水和沉积后保持原始形状。此外，我们使用一种酶活化测定来定量干燥表面上的非共价蛋白质复合物的活性。这些结果共同表明ES-IBD在结构生物学中具有很大的应用潜力，但也勾勒出需要解决的挑战，以发挥其全部潜力。
作者：Paul Fremdling, Tim K. Esser, Bodhisattwa Saha, Alexander Makarov, Kyle Fort, Maria Reinhardt-Szyba, Joseph Gault, and Stephan Rauschenbach
论文ID：2203.04671
分类：Biomolecules
分类简称：q-bio.BM
提交时间：2022-09-14