静态单分子定位显微镜图像的横向分辨率度量:基于时间解析对相关函数的方法
摘要:单分子定位显微镜(SMLM)可以使细胞结构的可视化尺寸达到比可见光衍射极限小一个数量级,并且对SMLM数据集的分辨率进行准确、客观的评估是图像处理和分析流程的一个重要方面。本文介绍了一种简单的方法,利用在空间和时间上都进行评估的成对自相关函数来测量静态样品SMLM图像的时间间隔相关的点扩散函数。利用这种方法,我们证明了实验获得的图像通常具有比仅考虑定位精度所期望的更宽的有效点扩散函数,这是由于漂移和漂移校正算法产生的附加不确定性所导致的。该分辨率度量报告了我们能够准确测量标记对象间距离的程度,并且与常用的Fourier Ring Correlation度量相辅相成,后者也考虑了空间采样。该方法在模拟定位、DNA origami标尺和用染料结合的抗体或荧光融合蛋白标记的细胞结构上进行了演示。
作者:Thomas R. Shaw, Frank J. Fazekas, Sumin Kim, Jennifer C. Flanagan-Natoli, Emily R. Sumrall, Sarah L. Veatch
论文ID:2202.08798
分类:Biological Physics
分类简称:physics.bio-ph
提交时间:2022-02-18