通过同时干涉反射和全内反射荧光显微镜成像动态微管和相关蛋白质
摘要：使用不同的技术已经用于直接观察细胞骨架纤维及其相关蛋白质。全内反射荧光(TIRF)显微镜具有较高的信号与背景比，但它容易造成荧光蛋白的光漂白和光损伤。无标记技术如干涉反射显微镜(IRM)和干涉散射显微镜(iSCAT)可以规避光漂白问题，但不能轻易观察到单分子。本研究提出了一种将IRM与商用TIRF显微镜相结合的方法，用于同时成像体外动态微管相关蛋白(MAPs)和动态微管。我们的方法允许高速观察MAPs与动态微管的相互作用。相比现有的两色TIRF装置，我们的方法消除了对微管标记和其他多个光学部件(如第二个激发激光器)的需求。我们在同一张相机芯片上同时成像两个通道，以避免图像对准和帧同步问题。我们通过观察单个动态微管上的单个肌动蛋白分子来展示我们的装置的效果。
作者：Yazgan Tuna, Amer Al-Hiyasat, Jonathon Howard
论文ID：2201.07911
分类：Biological Physics
分类简称：physics.bio-ph
提交时间：2022-01-21