结合荧光波动和光漂白来量化表面密度
摘要：使用一种称为pbFFS的方法，被称为光漂白波动荧光谱（pbFFS），旨在表征带有未知分布或荧光物质的分子或粒子。利用光漂白作为控制参数，pbFFS提供了关于标签分布的信息以及这些分子的绝对密度或浓度更可靠的估计。我们提供了pbFFS方法的完整理论推导，并在实验中将其应用于测量一层标记有荧光素联亲和素分子的单分子层的表面密度，该层可作为生物仿生系统的基础平台。通过pbFFS测得的表面密度与椭圆测量等更标准的表面技术的结果一致。与这些技术相比，pbFFS具有两个主要优点：它可以进行原位表征（无需专用底物）并且适用于吸附分子的低质量，正如此处所示，即通过量化结合到草酸亚甲胎蛋白层上的生物素-Atto分子的密度。除了分子固定在表面上，我们还将pbFFS应用于在溶液中扩散的分子，以确认在表面上发现的标签分布。因此，pbFFS提供了一套工具，用于研究连接到可变数量荧光物质的分子，旨在量化分子数量或荧光物质的分布，后者对寡聚化研究尤为重要。
作者：Julius Sefkow-Werner, Elisa Migliorini, Catherine Picart, Dwiria Wahyuni, Irene Wang and Antoine Delon
论文ID：2110.14319
分类：Biological Physics
分类简称：physics.bio-ph
提交时间：2022-01-25