RecA和RecB：通过单分子敏感性在活体大肠杆菌中探测DNA修复蛋白与丝裂霉素C的复合物
摘要：RecA和RecBCD复合物是维护和修复DNA的关键细菌成分，RecBCD是一种螺旋酶-核酸酶，利用同源重组来解决双链DNA断裂，并且还促进单链DNA与RecA形成RecA纤维。这是双链断裂DNA修复途径中的一个重要步骤。然而，关于RecA和RecBCD在活细胞中的机制角色仍然存在问题。在这里，我们使用亚秒超分辨率荧光显微镜来确定在单个活的大肠杆菌细胞中，RecA和RecB的荧光报告的空间定位。通过引入DNA交联剂丝裂霉素C，我们诱导DNA损伤，并量化RecA和RecB的物质摩尔比、拷贝数和分子活动性的变化。我们发现这两种蛋白质在分子热点中聚集以进行修复，导致RecA纤维的物质摩尔量相当于数百个分子，在DNA损伤之前主要以RecA四聚体形式发挥作用，但在形成成熟纤维时转变为大约六聚体亚基。出人意料的是，我们发现在生理上占优势的RecB形式是二聚体。
作者：Alex L. Payne-Dwyer, Aisha H. Syeda, Jack W. Shepherd, Lewis Frame, Mark. C. Leake
论文ID：2110.01573
分类：Biomolecules
分类简称：q-bio.BM
提交时间：2023-01-25