酶结合的NADH中的双光子激发荧光动力学:荧光衰减时间的异质性和各向异性弛豫
摘要:在含有酒精脱氢酶(ADH)缓冲溶液中,通过720nm飞秒激光脉冲对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的436nm偏振荧光动力学进行了实验和理论研究。采用全局拟合程序从实验数据中确定荧光参数。通过对溶液中NADH结构的从头计算解释实验结果。提出了一个理论模型来描述酶-NADH二元复合物中的偏振荧光衰减,考虑了几种可能的相互作用情况。我们认为与自由NADH相比,ADH结合的NADH中纳秒衰减时间值显著增强的来源可以归因于在无极性ADH-NADH结合位点环境中,由于减小了烟酰胺环中的电荷分离而导致非辐射弛豫概率的显著减小。ADH-NADH复合物中纳秒时间域存在一个衰减时间,而在自由NADH中观察到两个衰减时间,可以归因于ADH位点内的单个NADH展开的trans构象。实验数据和理论发展的比较表明,在大约1纳秒的各向异性弛豫时间存在,最有可能与激发的NADH和ADH结合位点之间的相互作用相关,导致核分布的重新排列和荧光跃迁偶极矩的旋转。
作者:Ioanna A. Gorbunova, Maxim E. Sasin, Dmitrii P. Golyshev, Alexander A. Semenov, Andrey G. Smolin, Yaroslav M. Beltukov, Oleg S. Vasyutinskii
论文ID:2105.03147
分类:Biological Physics
分类简称:physics.bio-ph
提交时间:2021-05-10