在溶液中困住的重组FoF1-ATP合酶中的快速ATP依赖性亚基旋转
摘要：扩展观测时间以监测 FoF1-ATP 合成酶单分子功能旋转的动力学 用于自由扩散的脂质体中嵌入了FoF1-ATP合成酶的单分子F"orster共振能量转移 (smFRET) 已被用于检测其亚单位旋转。我们现在报告了通过使用反褐变的电动力学陷阱 (ABEL陷阱)，功能旋转的动力学监测可以从毫秒级延长到秒级。这些延长的观测时间使我们能够观察到溶液中个体 FoF1-脂质体功能旋转的波动率。广泛的依赖于ATP的催化速率分布被揭示出来。质子的电化学势的积累被确认限制了ATP水解的最大速率。在离子载体或解偶剂的存在下，单一再构造的FoF1-ATP合成酶中测量到的最快亚单位旋转速度为每秒180次完整旋转。这比生化集合平均值测得的速度要快得多，但不及先前报告的脱离嵌入在膜中Fo复合物的孤立单个F1复合物的最大旋转速度快。进一步应用ABEL陷阱测量将有助于解决此类亚单位旋转速率波动的机理原因。
作者：Thomas Heitkamp, Michael B"orsch
论文ID：2103.11986
分类：Biomolecules
分类简称：q-bio.BM
提交时间：2021-06-29