增强MiaPaCa-2胰腺癌球体的长期培养和操控的协同方法
摘要:肿瘤球体有潜力用作临床前化疗敏感性测定。然而,三维肿瘤球体的制备仍具有挑战性,因为不是所有肿瘤细胞系都能形成具有规则形态的球体,而且球体转移常常会导致解聚。在胰腺癌领域,MiaPaCa-2细胞系是一个有趣的研究模型,但众所周知,该细胞系难以形成稳定的球体;而且,从该细胞系形成的球体薄弱且难以管理和收集以进行进一步的多重染色和成像分析。在这项工作中,我们比较了不同的方法(即挂滴法、圆底孔板和Matrigel埋藏法,每种方法在培养基中有无甲基纤维素)以评估哪种方法能够更好地克服这些限制。形态测量分析表明,在甲基纤维素存在下的挂滴法导致了有组织的球体;有趣的是,定量PCR(qPCR)分析反映了形态特征,表明同一球体表达了CD44、VIMENTIN、TGF beta1和Ki67的最高值。此外,我们研究了在不同疏水性基质上培养MiaPaCa-2球体的生成情况,以减少与培养基接触的面积,进一步改善球体形成。
作者:Marta Cavo, Donatella Delle Cave, Eliana D'Amone, Giuseppe Gigli, Enza Lonardo, Loretta L. del Mercato
论文ID:2102.13172
分类:Tissues and Organs
分类简称:q-bio.TO
提交时间:2021-03-01