单个SMALPs中通过homoFRET和ABELtrap观察神经tensin受体1的单体-二聚体转变
摘要:神经生长因子受体1(NTSR1)在细胞外小分子或光子的作用下会被激活。神经生长因子受体1是一种被13个氨基酸的神经生长因子激活的G蛋白偶联受体。神经生长因子的结合会导致受体构象改变,从而触发细胞内信号转导过程。最近的单分子研究报告了NTSR1在体外存在动态的单体-二聚体平衡,然而,在活体哺乳动物细胞中对NTSR1的寡聚状态进行生物物理学特性描述是复杂的。本研究通过将带有mRuby3标签的人源NTSR1溶解于10纳米大小的可溶性脂质纳米颗粒中,通过添加苯乙烯-马来酸共聚物(SMALPs)溶解HEK293T细胞的质膜。通过使用包括亮度、荧光寿命和各向异性在内的多参数单分子光谱分析逐个分析单个SMALPs在溶液中。通过在共聚焦ABELtrap中使用单个SMALP探测来改进亮度分析,以延长在溶液中的观察时间。双峰亮度分布表明在添加神经生长因子之前,SMALPs或质膜中存在相当比例的二聚体NTSR1。
作者:Andr''e Dathe, Thomas Heitkamp, Iv''an P''erez, Hendrik Sielaff, Anika Westphal, Stefanie Reuter, Ralf Mrowka, Michael B"orsch
论文ID:1902.01511
分类:Biomolecules
分类简称:q-bio.BM
提交时间:2019-02-06