使用微流控浊度计和自动化细胞追踪,在单个蛋白质水平上进行高通量基因表达分析
摘要:结合微流体学、时域单分子显微镜和自动图像分析,我们开发了一种方法,每次实验可以观察到超过3000个指数增长的大肠杆菌细胞的完整细胞周期。该方法能够在细菌细胞周期中单个蛋白质的水平上分析基因表达的速率。我们还证明了使用短激发光脉冲可以计数非特异性DNA结合的LacI-Venus分子的数量。转录因子位于细胞核中的核糖体上,并且似乎均匀分布在染色体DNA上。在细胞周期的开始观察到LacI表达的增加,可能是因为某些基因副本由于细胞分裂时的分配不平等而被解除了抑制。最后,我们观察到富培养基中的细胞在出生时的长度变化比代际时间变化更大,而在贫贱繁殖基质中则相反。
作者:G. Ullman, M. Wallden, E. G. Marklund, A. Mahmutovic, I. Razinkov, J. Elf
论文ID:1207.4048
分类:Quantitative Methods
分类简称:q-bio.QM
提交时间:2012-07-18