一种具有异常广泛多环芳烃底物特异性的萘双加氧酶的表征
摘要：Sphingomonas CHY-1中，一个单环羟化二氧化酶负责对由最多五个环组成的多环芳香烃进行初始攻击。该酶的组分被分别纯化和表征。根据EPR测量和铁测定，氧化酶组分（ht-PhnI）显示每个α亚单位含有一个Rieske型[2Fe-2S]团簇和一个单核铁中心。稳态动力学测量表明，该酶对萘具有相对较低的表观米氏常数（Km= 0.92 $\pm$ 0.15 $\mu$M），以及2.0 $\pm$ 0.3 $\mu$M-1 s-1的表观特异性常数。萘被转化为相应的1,2-二氢二醇，并伴随着NADH的氧化。另一方面，另外八种多环芳香烃的氧化速率较慢，并且耦合效率随酶的反应速率降低。解耦与过氧化氢的形成有关，这可能对细胞有害，并可能抑制多环芳香烃的降解。在单回合反应中，当有机溶剂存在时，ht-PhnI单独催化多环芳香烃羟化的速率较快，表明底物向活性位点的转移是一个限制因素。四环多环芳香烃蒽和苯并[a]蒽经历双环二氢二醇化反应，形成了相当比例的双顺式二氢二醇。此外，苯并[a]蒽的二氢二醇化反应产生了三种二氢二醇，酶对1,2和10,11位置的碳具有偏好。这是首次对能够二氢化四环和五环多环芳香烃的二氧化酶进行的表征。
作者：Yves Jouanneau (LCBM, BBSI), Christine Meyer (LCBM), Jean Jakoncic, V. Stojanoff, Jacques Gaillard (LRM/SCIB)
论文ID：0904.3254
分类：Biomolecules
分类简称：q-bio.BM
提交时间：2009-04-22