心脏钙敏感的调控开关：一个处于动态平衡状态的系统
摘要：心肌Ca敏感的调节开关是蛋白质组装通过自发变化来传递配体结合的典型例子。这个开关是肌钙蛋白C(TnC)的二聚复合物，为Ca的异构传感器，和肌钙蛋白I(TnI)，为异构报道者。时间解析平衡FRET测量表明，开关有两个步骤：TnI非依赖的Ca预处理步骤和TnI依赖的开启步骤。为了解决TnI在激活中的机械角色，我们在快速添加缺失成分(Ca或TnI)后进行了停流FRET测量，并在快速螯合Ca之后进行了去活测量。时间解析测量、停流测量和Ca滴定测量在TnC-TnI异源模型的新数量动态模型方面进行了全局分析。分析提供了系统可访问粗粒化状态之间的距离变化、自由能变化和转化速率的中尺度参数化结果。结果显示：(i)Ca诱导的预处理步骤在开启之前是激活的速率限制步骤，(ii)关闭是去活的速率限制步骤，(iii)TnI引发开启，(iv)当未结合调节Ca时，存在不完全去活的人群，它产生了一个辅助激活通路，并且(v)当结合调节性Ca时，观察到一个动态转化开放(活跃)和预处理关闭(部分活跃)构象的3:2混合物(15°C)。温度依赖的停流FRET实验提供了近乎完整的热动力学参数化的开启。
作者：John M. Robinson, Herbert C. Cheung, and Wenji Dong
论文ID：0805.3544
分类：Biomolecules
分类简称：q-bio.BM
提交时间：2009-11-13